时间:2025-08-29 01:11 / 来源:未知
外文期刊网免费入口基因组DNA经限制性内切酶酶切后目前,正在AFLP时间的根源上又开展了一种新的分子象征———TE2AFLP(三内切酶扩增的束缚片断长度众态性, three endonuclease amplified fragment length polymorphism) .该时间是由荷兰科学家Vander Wurff等正在2000腊尾宣布的. TE2AFLP也是最初扩增束缚性内切酶片断,然后正在高辨别率凝胶(平时为序列剖判胶)上电泳辞别这些扩增的片断,再遵照这些片断的长度来检测DNA众态性。与AFLP差别的是要用2种低频率切点内切酶和1种高频率切点内切酶羼杂酶切基因组DNA. TE2AFLP保存和开展了AFLP的所长,取胜了AFLP常睹的缺陷,具有牢靠、迅速和轻易的特质.所以,它将普通地被运用。
道理:此时间是创设正在基因组束缚性片断根源上的PCR扩增。因为差别物种的基因组DNA巨细差别,基因组DNA经束缚性内切酶酶切后,爆发分子量巨细差别的束缚性片断。应用特定的双链接头与酶切DNA片断结合举动扩增响应的模板,用含有抉择性碱基的引物对摸板DNA实行扩增,抉择性碱基的品种、数目和次第决心了扩增片断的出格性,惟有那些束缚性位点侧翼的核苷酸与引物的抉择性碱基相立室的束缚性片断才可被扩增。扩增产品经放射性同位素象征、聚丙烯酰胺凝胶电泳辞别,然后遵照凝胶上DNA指纹的有无来检绝伦态性。